【售后小课堂】说说凝胶色谱维修de 那些事儿

随 着凝胶色谱GPC/SEC 设备的升级，多数实验室已经或者正在用更先进的多检测器系统取代相对传统单一的示差检测系统。但实验者得到更全面更接近研究对象真实分布的信息同时，对新 系统的性能和维护保养产生了一些担心，甚至有的实验者异口同声的发出了这样的判断：新系统检测器多，更容易出问题。对于此，笔者有不同的看法，本文通过几 个例子来揭示事实的真相。还请各位实验室高手听笔者慢慢道来。

首先，我们有必要明确一些基本概念，从而制定实验规范，提高仪器使用率。正如，想让你的马儿日行千里必须给他日行千里的口粮一样。我们需要做好实验准备，才不会事倍功半，徒劳一场。

众 所周知，GPC/SEC 是液相色谱的一个分支。那么，在选择流动相时一定要按照HPLC 级的要求选择溶剂，配置的流动相达到仪器运行的基本要求。即多检测器对流动相的要求，增加了检测器之后，每个新检测部分都有新的要求。一定要做好实验前的 准备工作，仪器处在较理想的实验条件下，才能事半功倍。本文力图通过讲述马尔文两个仪器故障维修小故事，来充分剖析故障原因，从而提高操作者对仪器性能的 掌握，建立合理的实验室操作规则。

第一个故事：由氘灯不亮引发的连锁反应
某 高校实验室的马尔文GPC 配置为自动进样器和UV,RI,VIS,LS(RALS/LALS)四检测器联用，系统运行了4 年，常用流动相为THF。最近更换流动相为DMSO，由于寒假的原因，停用了近2 个月。重新开机，UV 检测器自检不能通过，提示氘灯点不亮。见图一：

仪器背景了解：
UV 检测器的灯源是一个消耗品，提供了紫外区190-490 纳米的稳定光源，使用寿命约2000小时。所以仪器设计者在前面板添加了一个standby 按钮，图二所示。当仪器不做样品时，按住3 秒钟，即进入节约光源模式。增加光源的有效使用寿命。

原因解析：
1， 使用者在不操作实验时，仍点亮氘灯，不进入standby 节约模式；

解决问题：
更换氘灯灯源

得到的启示：
掌握仪器的操作技巧，延长使用寿命，节约维护成本。

这个故事希望可以让大家理解：一个明显故障的存在，可能是其他故障反映。我们怎么做才能彻底解决问题，或者怎么才能避免这样的连锁反映呢？

第二个故事：仪器数据变化是找到仪器故障的钥匙

很多实验者尤其是没有特定管理员的实验室，往往发生这样的抱怨：“我们什么也没有动，仪器就出故障了”。我相信，我们都是无神论者，事实的发生总会有原因这需要我们通过数据来寻找蛛丝马迹：

某大型企业研发实验室，由于每个人负责的项目比较多。相应的仪器设备也比较多，当项目来时，往往仪器也会出问题。为什么呢？

在 没有实验时，仪器处在Idle 状态，是低速模式。项目来了，需要马上进行实验。这是一个是需要唤醒它，使之进入战斗状态即Run 的模式。那么这个换相过程需要注意：一定是在低流速下开始，按照阶梯流速，缓慢的变化到实验条件。并且每个流速下，必需达到3-5个柱体积，才能切换到下 一个更高的流速。下面是一个例子，仪器系统是一个包含VIS 黏度，LS 光散射检测器的多检设备。报修说是泵漏液，但是完成泵头PM 维护压力值正常之后，实验者却看到的光散射信号为负值，IP 值为0mv。那么，我们可以通过查找数据文件，看看是什么时候发生变化，到底出现了什么故障：

从以上数值的变化说明了什么呢？

图 一是仪器正常状态下的数值，注意此时的IP 值是29mv，此时的日期是2015-05-14。图四中IP 值为0mv，说明检测器已经由漏液发生，并且很严重。LS 值为负值，并且开关laser 无任何变化；说明光路已经堵塞此时的日期是2015-05-23。已经排除laser 本省损坏。图二中LS 噪音突然增大，说明仪器体系发生了较大变化。也就是说在2015-05-14 到2015-05-23 期间一定发生了什么操作，引起了仪器的变化。经过再三和实验者的沟通，才最终明白是在5月20 号开始系统开始换相到5 月21 号开始低流速运行，到5 月23 号流速设定到实验值。那么问题很清楚，在换相过程中，因为压力过高，LS 的流通池发生了渗漏，起初是渗漏，现
在到了彻底崩溃的状态。表面上是压力高，泵漏液了。其实，检测器内部也发生了巨大变化。不得不更换更多配件了。

这个故事说明，外部的一些微小的变化预示着内部可能发生了巨大变化！请耐心的告诉自己仪器发生了哪些变化，这些变化是由什么引起的。~~~~~~

总结：

任何问题的出现，总会有其发生的根源。我们需要做的是仔细回忆我们队仪器做了什么，认真观察仪器发生了什么变化，耐心分析这些变化的原因找到解决的途径。

希望我们用做科研的精神和态度来呵护对待我们的帮手---实验室仪器之一马尔文SEC/GPC。