安捷伦色谱小讲堂028 -什么原因导致色谱柱压力高？解决的一般步骤是什么？

色谱柱压力升高是液相工作者们在实际应用过程中较为常见的问题，往往是进前几针压力还好好的，忽然压力就升高了；或者前一天正常，而第二天来压力就升高了。还有在使用过程中像慢性疾病一样，使用一段时间后升高，让使用者们“痛苦”不堪。这些现象普遍存在于日常的实验工作中，究竟是什么原因导致这些现象的产生呢？让我们一起来寻找原因和解决的方案吧！

压力升高的主要原因总结为以下几点：

1. 色谱柱入口筛板堵塞

2. 样品或流动相缓冲盐在色谱柱内析出

3. 色谱柱污染

4. 流动相粘度过高

5. 在线过滤器或者保护柱堵塞

6. 管线堵塞

7. 聚合物色谱柱：溶剂改变导致溶胀

分析了这么多原因，其实很多原因我们都可以从平常的小事做起，来改善这样的现象发生，例如流动相和样品都要用0.2µm的滤膜过滤，注意日常清洗维护等等。还可以针对某个原因参照如下途径来改善压力高的情况。

解决途径：

1．用标准流速的1/4流速反冲色谱柱，不接检测器，去除筛板堵塞物。（除1.8µm粒径色谱柱外。）

2．尽量选用流动相做样品溶剂，减少样品析出的可能。尽可能降低流动相中盐的浓度。使用带盐的流动相后，应使用与流动相中盐相等比例的超纯水和有机相冲洗色谱柱10到20柱体积，再保存在纯的有机溶剂中。

3．色谱柱污染，需要对色谱柱清洗再生，以常用硅胶正相和反相色谱柱为例：（其他规格色谱柱首先参照色谱柱说明书。）参照下图所示：

4．尽量选择粘度小的溶剂做流动相，或者升高柱温。

5．检查在线过滤器滤头以及保护柱柱芯，必要时更换。

6．拆卸管线以便确证，必要时更换。

7．对于聚合物基质的色谱柱，需要了解溶剂兼容性信息。