【干货推荐】各类光谱仪使用技巧 Q&A汇总
11月13日，HORIBA科学仪器事业部举办了2015年的最后一场网络讲座——各类光谱技术使用技巧，涉及拉曼、荧光、椭偏技术。
此次授课的三位博士均是HORIBA资深应用工程师，他们除了会定期举办用户培训班，还会完成大量的分析测样工作，他们与网友们在线分享了这些宝贵的测样技巧。我们也将这些技巧做了汇总，不知道您有没有遇到过同样的问题？
课程1：荧光光谱
Q：氙灯的有效激发波长是多少？
A：在荧光光谱仪中常用波长范围240nm（无臭氧氙灯）或200nm（臭氧氙灯）至~1000nm；氙灯光源自身最远至~2500nm；使用臭氧氙灯时，避免对人体健康的影响，请一定配置除臭氧装。
Q：如果必须选滤光片，请问选择的原则是什么？比如350nm和400nm，激发280nm？
A：用在消除倍频峰时，保证滤光片完全通过发射峰，截止激发波长。
Q：原位荧光液体化学反应池设计有什么讲究？
A：需要考虑原位实验环境，如：温度，压力，酸碱度及盐浓度等因素；光学部分考虑：收集角度，收集光学部件及收集距离等因素。
课程2：拉曼光谱
Q：选择什么激发波长，可以避开荧光干扰？
A：视荧光峰的位置，假如荧光出现长波长位置，如在600nm-800nm，我们可以使用<600nm的激发波长，比如532nm或473nm，反之如果荧光出现在短波长的位置，我们需要使用长波长，比如785nm作为激发光源。
Q：待测硅衬底上薄膜样品为100nm厚，用激光光斑聚焦（不是共聚焦拉曼）测到硅的拉曼信号，很难准确聚焦到薄膜上（薄膜太薄），如何解决？可以通过将薄膜样品倾斜使激光有一定倾角地打到薄膜上吗？
A：如果您的薄膜样品是透明的，通常激光容易穿透样品，打到基底上，获取的大部分都是基底的信号。您可以试着尝试紫外激发波长和共聚焦仪器，看能否有改进。
Q：用拉曼测荧光，需要注意一些什么问题？
A：一般拉曼测荧光是用短波长激发出长波长荧光，所以荧光的测试范围一般从大于激发波长的位置开始测。另外，拉曼测荧光需要注意所配探测器的最大测试范围，通常CCD的测试范围是到1050nm，如果要测更长的波长，需要用到近红外探测器；还有要注意的是荧光信号通常比较强，要调节激光功率和采集时间，确保信号不会饱和。
Q：Mapping扫描步长一般设为多少？用光斑的大小可以吗？
A：通常激光光斑的大小在1μm级别，所以一般设为0.5μm或1μm就差不多了，即可以把步长设为光斑半径大小。如果您的样品在亚微米级别或需要实现亚微米级别的空间分辨率，则可减小步长以获得较多的像素点，使图像看起来比较精细一些。
Q：我测铁电体的拉曼光谱时，加电场在铁电体上，光谱强度整体变小，是不是因为样品形变，影响到聚焦？
A：要判断样品是否有形变，可以在video聚焦状态下加电场，看显微图像是否会变虚，如果变虚，则加电场导致了样品的形变，影响到聚焦；否则可能是加电场引起的样品本质的变化。
Q：如果拉曼检测时光斑比较大，会影响信号质量吗？
A：使用低倍物镜时，通常光斑比较大，其激光功率密度会降低，在检测固体样品时会使信号减弱；但是由于它的收集角比较大，在检测液体等透明样品时则比较好，所以视您的样品而定。
Q：请问拉曼测试时透射模式和反射模式对样品的要求和红外一样吗？因为我们希望通过拉曼信号去判断液体样品的浓度，所以我们希望一次采集大面积的样品，不知道这种想法可行不可？
A：显微拉曼适用于任意样品，但是只能获取微区样品的信息；透射拉曼是激光穿透样品，获取样品的整体信息，一般只针对固体样品，需要对粉末进行压片，他的压片同红外不同，即不需要加KBr，不能引入另外的物质。如果您的液体样品是均匀的，则显微拉曼就可以了，无需采集大面积的样品；如果是胶体之类的不均匀样品，则可以使用DuoScan大光斑技术，而不是透射拉曼。
Q：你们Spot size 扩大到300μm后，激光强度是不是也需要对应加强？
A：DuoScan大光斑技术是光斑快速掠过一个扫描区域，获取整个扫描区域的平均光谱。其光斑的功率和普通的激光光斑功率一致，只是DuoScan光斑在某个点上的停留时间特别短，因而产生的热效应比较少，不容易烧坏样品，所以我们可以适当加大激光强度以增加信号强度。
Q：我测的样品拉曼位移比别人的高，是否是激光功率差异导致的？
A：如例子中的多晶Si会在不同的功率下发生峰位偏移，如果您的样品比较容易吸光，则会产生热效应，导致峰位往高波数位移。
Q：如何调好无色透明液体的聚焦？
A：可以采用激光光斑聚焦，将样品远离聚焦平面，然后将平台慢慢往上移，当光斑出现并达到最小时，即聚焦到样品表面了。
Q：较高功率（初始功率为200mw）的激光聚焦在金刚石压砧表面上会不会将金刚石烧坏？
A：纯的金刚石吸光系数较小，200mW应该不会烧坏，如果金刚石不纯，则有可能出现烧坏现象。建议从低功率慢慢往高试。
Q：如何判断一张拉曼光谱图是否有荧光干扰？
A：比较明显的是在谱图上看到有一个大包，或者是谱线基底不平，出现上翘或下降现象。当然，有些荧光也有可能是窄峰，此时需要换一个激发波长尝试，如果以cm-1为横坐标时，两个激发光获取的结果不对应，则说明有荧光峰存在。
课程3：椭偏光谱
Q：三元合金表面的氧化层厚度一般选择什么模型好呢？
A：视样品而定，如果氧化层是匀质结构，可以采用Ne
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