布鲁克质谱: 完整的生物制药表征解决方案

导读·Introduction

自上世纪80年代第一个生物制品重组人类胰岛素上市后，生物制药行业进入高速发展期。生物制品的安全性和有效性高度依赖于其结构，生物制品结构的表征是非常具有挑战性的工作，基于质谱的蛋白质表征则是生物制品结构描述的关键技术之一。采用自上而下和自下而上的方法，质谱能在各个水平提供药物结构详细信息。Bruker 公司建立了基于ESI-Q-TOF和MALDI-TOF/TOF的技术平台，为生物制品的表征提供最优的解决方案。

分子量测定‍‍‍‍

Buker ESI-QTOF类仪器拥有业内最高的分辨率，在测定完整抗体分子量（约150 kD）时相对质量误差可以控制在1 ppm以内，在分析抗体重链（约50 kD）时具有超高质量精度，可轻松实现重链同位素分辨。

ESI-QTOF测定抗体脱糖分子量，相对质量误差<1 ppm

ESI-QTOF分析抗体重链（约50 kD），轻松实现重链同位素分辨

MALDI-TOF/TOF测定完整抗体分子量，具有分析过程简单、节省时间、节约样品、节约试剂等优点，并选用特殊基质使抗体带多电荷，从而得到高质量精度的分子量测定结果。因此，适用于快速的克隆筛选和杂质监测等。

MALDI-TOF/TOF测定抗体脱糖分子量，质量精度可以达到30 ppm

肽谱图分析

Buker ESI-QTOF具有的超高技术性能，能轻松满足肽谱图分析需求，同时全灵敏度分辨率使高丰度的肽段和低丰度的肽段同时被检测到，降低潜在的药物安全风险。

不牺牲灵敏度的高分辨，使高丰度的肽段，中低丰度的肽段（0.2% N-Met和0.0014% N-Met(ox)）能同时被检测到，大大降低数据丢失带来的风险

MALDI-TOF/TOF独特的TDS（Top Down Sequencing）技术能在完整抗体水平实现N-/C-端氨基酸序列确证，并能完成Glu/Gln环化导致Edman降解所不能完成的N-端序列确证。

TDS技术具有超简单的工作流程

二硫键确证‍‍

二硫键对蛋白质高级结构和生物活性具有重要作用，Bruker建立了基于ESI-CID、ESI-ETD和MALDI的多种解决方案，并配合Bruker独有的DisulfidDetectTM软件，可以实现已知二硫键的确证和未知二硫键的发现，并轻松进行二硫键连接方式示出，发现二硫键的错配。

DisulfidDetect™软件进行二硫键连接方式示出

糖基化分析

抗体糖基化是最重要的翻译后修饰之一，糖基化分析最主要的挑战为样品前处理复杂、糖苷或糖肽离子化效率低、糖基化分析软件匮乏。针对这些挑战，Bruker通过与英国的专业糖基化分析公司Ludger合作，提供完整的样品前处理解决方案；通过专利的CaptiveSpray nanoBooster™离子源，使糖苷或糖肽离子化效率提高10倍以上，MALDI-TOF/TOF在糖基化分析上的应用使选择更多样；Bruker独有的GlycoQuest™能完成复杂样品的中的N-和O-糖肽自动检测、鉴定和相对定量。

CaptiveSpray nanoBooster™离子源

基于ESI/MALDI的糖肽和游离多糖分析工作流程