ZenoTOF+7600系统EAD技术表征人EPO中N-糖基化和O-糖基化修饰

应用领域:蛋白/抗体/蛋白质组,多组学/蛋白质组/代谢组/脂质组,蛋白/抗体/蛋白质组,多组学/蛋白质组/代谢组/脂质组

检测样品:人EPO

检测项目:N-糖基化,O-糖基化修饰

方案摘要

人促红细胞生成素(EPO ) 是一种糖蛋白,可刺激红细胞生成,是多种贫血病临床治疗的主要药物。EPO分子有4个糖基化位点,其中3个N-糖基化位点 ( Asn24,Asn38,Asn83 ) 和1个0-糖基化位点 ( Ser126 ),EPO分子量的40%为糖类。糖基化对稳定EPO的体内生物活性具有重要作用,倘若缺乏糖链,则EPO在体内迅速被水解而失活。

EPO中N-糖为复杂型寡糖,该类型寡糖在组成上可分为糖核部分、天线部分及未端唾液酸部分,而且未端唾液酸的O-乙酷化、0-甲基化等修饰程度高,导致EPO存在高度异质性,给糖型表征带来很大挑战。

本文以ZenoTOFTm 7600系统特有的电子活化解离 ( EAD )碎裂技术',结合SCIEX Biologics Explorer软件提供的流程式的分析方法,从糖肤水亚实现了对EPO的N-糖基化和O-糖基化的深度表征。

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