便于N-糖分析的单次用和高通量HILIC SPE及IgG对照标准品

应用领域:蛋白/抗体/蛋白质组,生物制药/仿制药

检测样品:糖蛋白

检测项目:N-糖

方案摘要

背景

蛋白质的糖基化反应是十分有意义的翻 译后修饰,可以调节蛋白质的结构和功 能。生物治疗药物的糖基化作用无疑是 必须进行彻底表征与监测的结构特征, 尤其是在多聚糖图谱的变化与疗效和/或 免疫原性的变化相关时。 

一套用于评价糖蛋白中N-糖的常规应用 方法包括:通过PNGase F释放出多聚糖, 采用具有荧光活性的2-氨基苯甲酰胺 (2-AB)进行标记,然后采用亲水作用色谱 法(HILIC)进行分离,最后由荧光检测器 (FLR)进行检测(图1)。此工作流程中,比 较复杂的是样品制备步骤。为使此过程 更加直观,沃特世(Waters®)推出了 GlycoWorks,将N-糖制备与分析所需的诸 多耗材组合在一起。最值得注意的是, GlycoWorks实现了HILIC SPE的前/后标记纯化 步骤,这对于确保方法的稳定性而言非 常重要。

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