酵母双杂交检测实验技术服务
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酵母双杂交检测实验技术服务

产品属性

  • 品牌达晖生物
  • 产地广州
  • 型号酵母双杂交检测实验技术服务
  • 关注度34
  • 信息完整度
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产品描述

                        蛋白的酵母双杂交实验是以酵母的遗传分析为基础,研究反式作用因子之间的相互作用对真核基因转录调控影响的实验,同以往研究蛋白质-蛋白质之间相互作用的实验手段相比,酵母双杂交系统具有其独特优势。
1、融合体蛋白之间的相互作用是在真核酵母细胞内进行,蛋白质保持天然的折叠状态,这是其他离体生化检验方法所缺乏的,它所证实的蛋白质间相互作用将更接近于体内的真实水平。
2、 双杂交系统的敏感度非常高,蛋白质之间结合常数低至1mmol/L时都可以被侦测。
3、 在筛选cDNA 文库时,双杂交系统能够简捷地得到编码相互作用蛋白的基因序列,它只需构建质粒而不必准备抗体或纯化蛋白,省略了其它体外检测蛋白之间相互作用方法所必须的蛋白抽提、纯化等繁琐步骤。



酵母双杂交实验原理
以Gal4 系统为例,BD和AD 分别由Gal4 蛋白上不同的两个结构域(1-147aa 与768-881aa)构成。在利用GAL4 系统筛选cDNA 文库或研究蛋白间的相互作用时,DNA 结合结构域与靶蛋白即"诱饵"相结合,转录活化结构域与文库蛋白或要验证的蛋白相结合。一般情况下,单独的BD 可以与GAL4 上游活化序列(GAL UAS)结合但不能引起转录,单独的AD 则不能与GAL UAS 结合;只有当BD 与 AD 分别表达的融合蛋白由于相互作用而导致两者在空间上相互靠近时,BD 与AD 才能与 GAL UAS结合并且引起报道基因的转录,从而激活下游报告基因,通过这一系列实验来验证两个蛋白之间的相互作用。

酵母单/双杂交检测服务项目列表

服务项目服务说明周期报价酵母单杂交文库构建技术服务基于重组方法的文库构建方案4-6周询价酵母单杂交文库筛选技术服务DNA—蛋白质相互作用12-15周核蛋白体系酵母双杂交文库筛选技术服务基于pDEST22或pGADT7系统14-16周膜蛋白体系酵母双杂交文库筛选技术服务基于分离的泛素介导的膜蛋白酵母双杂交系统14-16周



广州达晖生物技术股份有限公司

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